γ干擾素釋放試驗分析技術(IGRA)概述

γ干擾素釋放試驗分析技術(interferon gamma release assay，IGRA)是一種用于結核桿菌感染的體外免疫檢測的新方法。利用結核分枝桿菌而非牛分枝桿菌BCG株系表達的抗原刺激外周血單核產(chǎn)生IFN-γ，2011年以前，全球只有澳大利亞和英國兩種γ干擾素釋放試驗（IGRA）試劑盒被批準用于臨床檢測，2011年7月，國內(nèi)首款由海口VTI生物研究院研發(fā)生產(chǎn)的IGRA試劑盒(A.TB)正式獲國家食品藥品監(jiān)督管理局批準。

一、IGRA原理

機體感染結核桿菌以后，體內(nèi)存在特異的效應T細胞，并存在于患者的外周靜脈血中，當這些特異效應T細胞再次受到結核分枝桿菌特異抗原刺激時會分泌細胞因子γ-干擾素（Interferon γ，IFN-γ）。通過對該細胞因子的定量檢測，可以對疾病的感染狀況進行判斷，判斷機體被結核桿菌感染的風險。

根據(jù)這個原理，選取存在于結核桿菌，但在卡介苗和大多數(shù)非結核桿菌中普遍缺失的RD1區(qū)編碼的ESAT-6和CFP-10作為結核桿菌特異性抗原，與新鮮采取的全血或者PBMC(外周血單個核細胞)充分混合孵育后，應用酶聯(lián)免疫法或者免疫斑點法檢測特異性γ-干擾素的釋放。

   由于效應T細胞存活時間很短（6周左右），而且具有特異性，因此可以作為機體是否正處于被感染或近期感染的指標，無論是否有臨床癥狀。

二、IGRA技術優(yōu)勢

1、特異性高

   IGRA所用刺激抗原為結核分枝桿菌特有抗原，而非結核分枝桿菌提取物，特異性高，不受卡介苗接種和非結核分枝桿菌的干擾，同時也不受導致類結核病癥狀的其他致病菌的影響。可以大大減少潛伏性結核假陽性患者的醫(yī)療花費。

2、靈敏度好

不僅對細菌學檢查陽性結核病患者檢出率較高，對菌陰及其他結核病患者也有90%以上的檢出率，而菌陰及其他結核病患者恰恰是目前臨床診斷的難點；在免疫力低下/受抑制人群中也有很高的檢出率，不受免疫力影響，肺內(nèi)結核和肺外結核均有較高的檢出率。

3、安全快速

   非人體試驗，不需隨訪，結果判定客觀，且不會對機體免疫狀態(tài)產(chǎn)生影響。24小時即可報告結果，患者無須返回獲取檢測結果，并且實驗室質(zhì)量控制幾乎可確保每次均可獲得有意義的結果，在大型結核控制項目的背景之下IGRA具有較好的成本效益。

   因為具有高敏感性和高特異性，并且不受卡介苗和大多數(shù)非致病分枝桿菌的影響，IGRA在結核診斷中的意義正在被越來越多的臨床實驗所證實，尤其對于像中國這樣普遍接種卡介苗的結核高負擔國家，更具有重要意義。

三、IGRA應用現(xiàn)狀

   IGRA技術是國際最新的用于結核桿菌感染的體外免疫診斷方法，在北美、歐洲和日本已被廣泛應用于結核桿菌感染的檢測，包括結核病輔助診斷、高危人群篩查、公共衛(wèi)生突發(fā)事件、體檢等(含不孕不育人群)。

美國CDC指南建議，在當前應用TST的所有情況下均可采用IGRA替代，多個大型公共衛(wèi)生機構已將TST全部替換為IGRA，美國和日本已經(jīng)將該技術寫入該國用于結核防治的指導原則中。